
详细介绍
蔡司Lattice Lightsheet 7
活细胞的长时间体积成像
蔡司Lattice Lightsheet 7使光片荧光显微技术可用于亚细胞分辨率下的活细胞成像,同时还可使用标准样品载具。借助该自动化且易用的系统,可以实现在数小时到数天内对亚细胞结构的动态变化进行体积成像,并在整个过程中提供出色的保护,避免光毒性对样品的影响。该系统能够以丰富细节探索生命动态变化的过程——轻而易举,超乎想象!
☆可直接在标准样品载具上检查活体样品
☆可在长达数小时、甚至数天内观察亚细胞层面的生命动态
☆以真实比例显示三维细节
☆不错过盖玻片样品动态变化的任何细节
☆可以把全部注意力放在您的实验上



晶格光片显微技术的原理

Conventional (Gaussian) light sheet microscopy splits fluorescence excitation and detection into two separate light paths, allowing to generate an inherent optical section by exciting only fluorescence from the in-focus plane.
通常(也称为高斯光片显微技术)以其低光毒性成像条件和出色的成像速度而闻名。突破性的激发和检测去耦化概念可以仅对检测物镜焦平面内的样品进行照明。根据样品移动片层并在每个焦平面上记录一张图像,即可在不暴露非焦平面样品的情况下获得体积数据。

Lattice light sheet microscopy overcomes the limitations of Gaussian beams (limited optical sectioning, limited field of view) and Bessel beams (strong rings, excitation of out-of-focus fluorescence) by generating long and thin light sheets to achieve subcellular resolution.
将光片显微技术与共聚焦范围内近各向同性分辨率的优点集于一身。优良的光束塑造技术创造了晶格状光片,此光片比标准高斯光片要薄得多,在相似的成像速度下可获得更高的分辨率。我们使用空间光调制器(SLM)创建光片的晶格结构,然后通过扫描装置投射到样品上。扫描装置对晶格结构进行抖动处理后,即可创建一个平滑的光片。
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带有激发物镜(1)、弯月透镜(2)和含自由波前光学元件的检测物镜(3)的样品载具和核心光学模块示意图。示例显示了不带(A)和带有折射率校正(B)的成像。
蔡司实现晶格光片显微技术
在开发Lattice Lightsheet 7的过程中,蔡司特别对易用性和与传统样品制备技术的兼容性予以了关注。倒置配置是标准样品载具可用于高分辨率显微技术的重要先决条件。该配置带来的挑战主要是折射率不匹配,因为荧光从样品中发射,经过水相细胞培养基、倾斜的玻璃盖玻片和水介质,然后进入检测物镜。
优质的蔡司光学元件
检测光路中特殊的蔡司光学元件可以补偿折射率的不匹配,使您能够像使用共聚焦显微镜一样轻松、快速地对样品进行成像。







蔡司Lattice Lightsheet 7应用案例

核纤层蛋白B1位于核膜上,在有丝分裂过程中参与核膜的分解和重组。在细胞周期不同阶段的有丝分裂过程中,许多不同类型的细胞经常会形成“核内陷"。核内陷可以表现为从核膜延伸并穿过细胞核的管状结构。这些独特的结构虽然经常出现,但迄今为止,大多数研究都在固定细胞中进行。因此,尽管已经存在很多假说,这些结构的功能在很大程度上仍处于未知状态。
该数据集由西雅图Allen Institute for Cell Science的细胞系记录:人工诱导多能干细胞,其内源性表达mEGFP标记的核纤层蛋白B1(AICS-0013)。过夜的实验记录了近8小时,每1.5分钟成像一个体积。在整个持续时间都可以观察到正在进行有丝分裂的细胞。在整个细胞周期中,可以清晰地观察到大多数细胞中核内陷的形成和动态。
低光毒性的照明对于有丝分裂的成像至关重要,因为该过程十分精密且光敏。为了防止受损DNA的复制,一旦有任何来自激发光的损伤,细胞的有丝分裂就会停止。要在更长的时间内对有丝分裂事件进行成像,则需要低光毒性的Lattice Lightsheet 7以及非常稳定的系统。快速的体积成像与近各向同性的分辨率相结合,可以从各个角度观察样品,检测独特亚细胞结构的每一个细节。蔡司Lattice Lightsheet 7是进行此类挑战实验的好工具,它让之前不可能实现的应用变为现实,且具有易用性,让您可以轻松将其用于研究。
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